Biotek洗板机校准步骤_新手实操指南

Biotek 洗板机作为实验室酶联免疫检测的核心自动化设备，校准精度直接决定洗板效果和实验数据准确性，长期未校准或校准操作不规范，会出现加液不均、吸液残留、针位偏移等问题，进而导致实验结果失真。本文为实验室新手整理了通用型 Biotek 洗板机（ELx405/ELx800/ELx50 等主流机型） 全套实操校准步骤，全程无专业设备要求，步骤简单易上手，适配实验室日常校准需求，同时附新手校准避坑要点，确保校准一次达标。

一、校准前必备准备（新手必看，避免校准失败）

1. 设备与耗材准备

准备适配 Biotek 洗板机的空白酶标板（96 孔）、无酶蒸馏水、10ml 移液管、电子天平（精度 0.01g）、吸水纸、洗板机专用校准程序（部分机型内置，无需额外下载）、设备操作手册；

2. 设备前期检查

1. 开机前检查洗板机加液针、吸液针无堵塞、无弯曲，管路连接无松动、漏气，洗液瓶加足量蒸馏水，废液瓶清空；
2. 启动洗板机，执行管路冲洗程序（默认冲洗 2 次），清除管路内残留洗液或杂质，避免校准受污染影响；
3. 确认洗板机无故障报警，载架、清洗头升降灵活，针位无明显偏移，基础功能正常。

3. 校准环境要求

放置在水平、平稳的实验台，避免震动；环境温度 20-25℃，湿度 40%-60%；远离强磁场、腐蚀性气体，避免阳光直射。

二、Biotek 洗板机核心校准步骤（新手实操版，按顺序操作）

本次校准覆盖 Biotek 洗板机加液量校准、吸液效率校准、针位校准、系统参数校准四大核心模块，为通用流程，不同机型仅操作界面略有差异，可对照设备手册微调。

（一）加液量校准（最核心，新手优先掌握）

加液量偏差是实验误差的主要原因，校准目标为单针加液量误差≤±2%，整板加液量均匀性≤±3%，步骤如下：

1. 取 1 块空白 96 孔酶标板，用电子天平称重并记录初始重量（记为 M1），平稳放置在洗板机载架上，确保夹紧固定；
2. 进入洗板机操作界面，找到校准模式（部分机型标注为 “Calibration”），选择 “加液量校准”，设置单孔加液体积（常规设置 100μl/200μl，按实验室常用参数选择），校准板位选择 “整板”；
3. 启动校准程序，洗板机完成整板加液后，暂停设备，小心取出酶标板，用吸水纸轻轻吸干板外残留液体（避免触碰微孔内液体）；
4. 再次用电子天平称重酶标板（记为 M2），计算实际平均加液量：(M2-M1)/96 / 液体密度（蒸馏水密度 1g/ml，直接换算为 μl）；
5. 若实际加液量与设置值偏差超过 ±2%，进入操作界面 “参数调整”，找到 “加液量补偿”，按偏差值调整补偿参数（如设置 100μl，实际 98μl，补偿 + 2μl）；
6. 重复上述步骤 1-5，直至实际加液量误差符合标准，保存校准参数（部分机型自动保存，手动机型需按 “Save” 确认）。

（二）吸液效率校准（避免微孔残留，影响实验结果）

吸液效率校准目标为单孔吸液残留≤1μl，整板无明显残留差异，新手实操步骤：

1. 向空白 96 孔酶标板内用移液管精准加入 200μl 蒸馏水 / 生理盐水（模拟实验洗液），将板放置在洗板机载架上固定；
2. 进入洗板机校准模式，选择 “吸液效率校准”，设置吸液参数（与实验室常规洗板参数一致，如吸液压力 50kPa、吸液时间 2s）；
3. 启动校准程序，完成整板吸液后，取出酶标板，用吸水纸轻拍板底，观察微孔内是否有液滴残留，重点检查板的四角和边缘孔；
4. 若发现单孔 / 多孔有残留，进入操作界面 “吸液参数调整”，适当提高吸液压力（每次 + 5kPa）或延长吸液时间（每次 + 0.5s），避免压力过高损坏针管；
5. 重复校准至所有微孔无明显残留，保存吸液校准参数；若个别针位持续残留，暂停校准，检查对应吸液针是否堵塞，疏通后再重新校准。

（三）针位校准（避免加液 / 吸液对位不准，漏液 / 吸液失败）

Biotek 洗板机针位分水平针位和垂直针位，新手校准无需拆机，仅通过操作界面和机械微调即可：

1. 垂直针位校准：启动清洗头升降程序，让加液针 / 吸液针缓慢下降至接近酶标板微孔底部，观察针管是否垂直对准微孔中心，若针位偏移，用手轻推清洗头两侧微调钮（部分机型为旋钮式），直至所有针管垂直对准微孔，拧紧微调固定螺丝；
2. 水平针位校准：在酶标板每个孔位边缘贴一小片白色标签纸，启动清洗头水平移动程序，让针管缓慢划过标签纸，观察针管划痕是否与孔位对齐，若偏移，进入操作界面 “水平偏移补偿”，按左右 / 前后偏移距离调整参数（单位 mm）；
3. 针位调整完成后，放入空白酶标板，执行一次标准洗板程序，观察加液时无漏液、吸液时无错位，即针位校准达标。

（四）系统参数校准（适配实验室常用耗材，通用校准）

该步骤为基础校准，适配不同品牌 96 孔酶标板，新手一键操作即可：

1. 进入洗板机校准模式，选择 “系统参数校准”，找到 “耗材适配” 选项，选择实验室常用的酶标板规格（96 孔标准板，孔距 4.5mm）；
2. 按设备提示完成载架位置、清洗头行程的自动校准，校准完成后，设备会提示 “参数校准成功”；
3. 若实验室使用特殊规格酶标板，可选择 “自定义耗材”，输入孔距、板长、板宽等参数，完成专属校准。

三、校准后验证步骤（新手必做，确认校准效果）

1. 空载验证：启动洗板机，执行空载加液、吸液程序，观察加液针出液均匀，吸液针无异常异响，管路无漏气、漏液；
2. 负载验证：放入空白酶标板，设置实验室常规洗板程序（如加液 200μl，洗板 3 次，吸干），完成后检查整板加液均匀、无漏液，吸液后无残留；
3. 数据验证：随机抽取酶标板 10 个孔位（含四角、中间），用移液管检测实际加液量，确认误差在标准范围内；
4. 记录留存：填写《Biotek 洗板机校准记录表》，记录校准日期、机型、校准参数、操作人员、校准结果，贴在设备侧面，便于实验室溯源和下次校准参考。

四、新手校准避坑要点（减少操作失误，保护设备）

1. 校准全程使用无酶蒸馏水，避免使用含缓冲液、洗涤剂的洗液，防止管路结晶影响校准精度；
2. 调整加液压力、吸液压力时，禁止一次性大幅调整，每次微调 5% 以内，防止压力过高损坏泵体和针管；
3. 针位校准时，力度轻柔，避免强行掰动清洗头和针管，导致针管弯曲、设备机械结构损坏；
4. 若校准过程中设备出现故障报警，立即停止操作，先排查故障（如管路堵塞、漏气），故障解决后再重新校准，禁止带故障校准；
5. 内置电池的 Biotek 机型，校准时确保设备电量充足，避免校准过程中断电导致参数丢失。

五、Biotek 洗板机校准周期（实验室合规要求）

1. 日常校准：更换洗液类型、更换酶标板品牌、设备移动位置后，需立即做简易校准（加液量 + 针位）；
2. 定期校准：实验室常规使用下，每月做 1 次全套校准，每天做 1 次简易校准；
3. 强制校准：设备维修后（如泵体更换、针管更换、管路维修），必须做全套校准，校准合格后方可投入使用；
4. 年度校准：按实验室 CNAS、GLP 合规要求，每年联系 Biotek 官方或第三方计量机构做一次计量校准，出具校准报告。